常有ELISA试剂盒操作者抱怨试验复杂,而经验丰富的教师们会觉得很简洁,一是熟能生巧,二是把握了其间的隐秘。
ELISA隐秘要害之洗刷:
洗刷在ELISA试剂盒进程中不是反应聚,但却是决议试验胜败的要害。洗刷的目的是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应进程中非特异性吸附于固相载体的烦扰物质。
洗刷如不*,特别在zui后一次,如有酶结合物的非特异性吸附,将使空白值升高。别的,在间接法中如血清标本内的非特异性IgG吸附在固相上而未被洗净,也将与酶标抗体效果而发生烦扰。
ELISA隐秘要害之加样:
在ELISA试剂盒中除了包被外,一般需进行45加样。在定性测定中有时不强调加样量的性,此时应该运用相同口径的滴管,保持的加样姿势,使每滴液体的体积底子相同。
在定量测定中则加样量应力求。标本和结合物的稀释液应按规则制造。加样时应将液体加在孔底,防止加在孔壁上部,并留意不行呈现气泡。