原位免疫PCR的原理
（一）基本原理
Sano等（1992）利用基因工程的方法表达了A蛋白与链霉亲和素的嵌合体分子获得成功，建立了免疫PCR技术。这是一种新的抗原检测系统，利用细胞工程和基因工程技术，巧妙地将抗原抗体反应的特异性同PCR的敏感性相结合，通过构建单克隆抗体与重组核酸的嵌合体分子，使得利用PCR技术检测蛋白成为可能。随后在免疫PCR的基础上，建立了在细胞或组织原位检测抗原的原位免疫PCR（in situ immuno-PCR）。
原位免疫PCR是一种检测系统，需要一种中介分子同时具有与DNA和抗体分子特异性结合的能力，其一端连接DNA,另一端连接抗原-抗体复合物，形成一个抗原-抗体-DNA连接物。作为标记的DNA分子用PCR扩增，检测特异的PCR产物，即可间接证明抗原的存在。该技术与原位PCR不同，就是在PCR与原位杂交之间加了抗体的因素。原位PCR是先对切片或涂片进行PCR,以对组织细胞内的DNA或RNA进行扩增，使其拷贝数大大增加，然后再进行原位分子杂交。而该技术是先用特异性抗体（单抗）与相应或目的抗原反应。这个抗体在对抗原反应之前加上了人体不存在的或无关的DNA序列。抗体与抗原特异性反应后，用PCR扩增加在抗体上的DNA序列，然后再用该DNA序列的探针进行杂交检测，也就是说用PCR及杂交的方法来放大免疫组织化学的反应，检测目标是蛋白质。
