ELISA试剂盒小珠通常为直径0.6cm的圆球,表面经磨砂处理后吸附面积大添加。
聚苯乙烯为塑料,可制成各种方式,在测定进程中,它作为载体和容器,不参与化学反响,加之它的报价,所以被广泛选用。
zui常用的载体为微量反响板,于ELISA测定的商品也称为ELISA板,用的规范板形是8×12的96孔式。
为便于作少数标本的查看,有制成8联或l2联孔条的,放入座架后,巨细与规范ELISA板一样。
聚苯乙烯载体的形状首要有三种:小试管、小珠和微量反响板。小试管的特征是还能兼作反响的容器,zui终放入分光光度计中比色。
作为ELISA固相载体,聚氯乙烯板的特征为质软板薄,可切开,价廉、但光洁度不如聚苯乙烯板。
ELISA板的特征是能够一同进行很多标本的查看,并可在特定的比色计上灵敏读出作用。
如今已有多种自动化仪器用于微量反响板型的ELISA查看,包含加样、洗刷、保温、比色等进程,对操作的规范化极为有利。
出色的ELISA板应该是吸附功用好,空白值低,孔底透明度高,各板之间和同一板各孔之间功用附近。
ELISA试剂盒免疫酶技能的首要试剂为固相的抗原或抗体、酶符号的抗原或抗体和与符号酶直接有关的酶反响底物。
可作固相载体的物质很多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的功用,抗体或蛋白质抗原吸附其上后保存正本的免疫活性。
因而每一批号的聚苯乙烯制品在运用前须查看其功用。
常用的查看办法为:以必定浓度的人IgG(通常为10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔内参与恰当稀释的酶标抗人IgG抗体,保温后洗刷,加底物显色,间断酶反响后别离测每孔溶液的吸光度。
控制反响条件,使各读数在0.8摆布。计算悉数读数的均匀值。
悉数单个读数与均匀读数之差应小于10%.与聚苯乙烯类似的塑料为聚氯乙烯。
在哪一种载体上阳性作用与阴性作用差异zui大,这种载体便是这一ELISA测定的zui合适的固相载体。
聚氯乙烯对蛋白质的吸附功用比聚苯乙烯高,但空白值有时也略高。
为比照不一样固相在某一ELISA测定中的好坏,可用以下办法加以查验:用别的免疫学测定办法选出一个典型的阳性标本和一个典型的阴性标本。
ELISA试剂盒将它们别离进行一系列稀释后,在不一样的固相载体上按预订的ELISA操作进程进行测定,然后比照测定作用。